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服务简介
引物合成是分子生物学研究的一个基础环节,引物合成的技能和经验在合成过程中具有决定性的影响。亚磷酰胺三酯法合成DNA片段,具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯法是将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的,合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的,相邻的核苷酸通过3′→5′磷酸二酯键连接。
百欧泰可提供引物合成服务,拥有技术人员和合成纯化技术,能为客户提供多种类的引物。除了可以合成普通引物以外,我们还可以合成各类碱基修饰引物(稀有碱基、硫代修饰、磷酸碱基、Spacers、NH2修饰、SH修饰)、标记引物(生物素、地高辛、电化学标记、淬灭基因 )、荧光标记引物(TAMRA、DABCYL、FAM、HEX、TET、Cy5)等。严格引物抽检制度,保证客户的持续满意度。
服务步骤
1 普通引物合成
获得游离的5′-羟基
预先连接在固相载体上的活性基团被保护的核苷酸与三氯乙酸反应,脱去其5′-羟基的保护基团DMT
合成DNA原料
亚磷酰胺保护核苷酸单体,与活化剂四氮唑混合,得到核苷亚磷酸活化中间体,它的3′端被活化,5′-羟基仍然被DMT保护,与溶液中游离的5′-羟基发生缩合反应
带帽反应
乙酸酐和1-甲基咪唑终止未参与缩合反应5′-羟基后继续发生反应
合成磷酸三酯
在氧化剂碘的作用下,亚磷酰形式转变为更稳定的磷酸三酯
2 修饰/标记引物合成
磷酸化、生物素、5′氨基修饰等多种修饰引物合成,可用于各种非放射性免疫分析、杂交反应等。
3 引物纯化
有RPC纯化、PAGE纯化、HPLC纯化等多种方法
4 质控检测
HPLC、MC、CGE等方法
服务优势
百欧泰团队具有丰富的大肠杆菌系统蛋白表达经验,可提供多种服务优势:
l 严格的质量监控,大规模、高纯度的品质保证,全程监控合成的效率;
l 服务为主:可根据客户需求综合分析,设计不同的实验方案,并对体系进行摸索与优化;
l 严格的质量把控,多重质量检测手段(HPLC、质谱MS),全面保证发货质量;
l 多种类的引物修饰,除各类修饰碱基(氨基、巯基、dI/dU等)外,还可合成双标引物;
l 专业的技术支持,随时为您解答引物出现的任何问题。
服务流程
双方沟通一致后确定实验方案,确定服务要求-签订合同—预付款-开始实验-成果交付
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