重组抗体制备-北京百欧泰生物科技有限公司

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噬菌体展示抗体文库服务

服务编号：BIOFW059

服务简介

经典的抗体产生需要杂交瘤细胞的生成，涉及动物免疫和细胞融合等步骤，制备时间长达数月。噬菌体表面展示技术直接略过了这两个步骤，由于抗体来源可以跨越物种，能直接提供人抗体，与此同时，也可以快速应用多种需要筛选的场景，例如抗体亲和力成熟等。

噬菌体展示技术其基本原理是：将编码多肽的外源DNA片段与噬菌体表面蛋白的编码基因融合后，以融合蛋白的形式呈现在噬菌体的表面，被展示的多肽或蛋白可保持相对的空间结构和生物活性，展示在噬菌体的表面。导入了各种各样外源基因的一群噬菌体，就构成一个展示各种各样外源肽的噬菌体展示库。当用一个蛋白质去筛查一个噬菌体展示库时，就会选择性地同与其有相互作用的某个外源肽相结合，从而分离出展示库里的某个特定的噬菌体，研究该噬菌体所含外源基因的生物学功能。

噬菌体展示技术为全人源治疗性抗体的研发提供了基础，拓展了定向进化技术在抗体多肽改造筛选方面的应用，对抗体药物的研制具有重要意义。用抗体、受体、核酸、以及某些碳水化合物可以从噬菌体随机肽库中筛选出与之结合的肽段，因此在抗原表位分析、分子间相互识别、新型疫苗及药物的开发研究方面有广泛的应用前景。

M13单链丝状噬菌体展示系统是目前应用广泛的文库展示系统，通过将蛋白、抗体或多肽与噬菌体pIII蛋白融合表达，使之参与噬菌体组装，并展示在噬菌体表面，形成噬菌体展示文库。使用噬菌体展示文库，针对特定靶分子进行3-5轮亲和筛选，可以富集能特异性结合靶分子的噬菌体，然后进行富集、扩增及基因序列测定，推断外源蛋白的氨基酸组成。

百欧泰目前开发的噬菌体展示技术服务平台涵盖了免疫抗体库、天然抗体库等常用的文库类型，可根据客户的特殊需求定制个性化文库，并提供灵活高效的筛选服务。

服务步骤

1 抗体基因库的获得

收集目标抗体宿主的免疫细胞，提取细胞总RNA

反转录后，使用多对引物分别扩增VH-CH1抗体基因片段和VL-CL1抗体基因片段

2 抗体基因库转化大肠杆菌

将扩增的抗体基因库连接至pComb3质粒，随后电转化大肠杆菌

鉴定抗体基因插入率

3 构建噬菌体载体

对大肠杆菌进行噬菌粒拯救

集上清获得噬菌体Fab抗体库

4 抗体库的滴度测定

噬斑培养实验检测

5 噬菌体抗体库的富集筛选

使用靶标抗原包被酶联板，加入噬菌体抗体进行孵育

服务优势

噬菌体展示抗体技术优势：

l 省去细胞融合步骤，避免因杂交瘤不稳定而反复亚克隆的繁琐程序，极大的提高库容量；

l 可筛选出与抗体特异性结果的噬菌体，获得该抗体识别的抗原表位，进行抗原表位分析；

l 可获得高亲和力的人源化抗体。

百欧泰团队具有丰富的大肠杆菌系统蛋白表达经验，可提供多种服务优势：

l 丰富的经验积累，成熟的技术路线，产品质量稳定可靠；

l 一站式服务，拥有完善的抗体，蛋白平台，用以支持噬菌体抗体的免疫及筛选工作；

l 服务为主：可根据客户需求综合分析，设计不同的实验方案，选择快速、合适的建库技术与筛选体系；

l 专业的技术支持，随时为您解答出现的任何问题。

服务流程

双方沟通一致后确定实验方案，确定服务要求-签订合同—预付款-开始实验-成果交付

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