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服务编号:BIOFW031
服务简介
稳定细胞系是指外源基因进入细胞并整合到染色体上并可以长期表达,构建稳定细胞系的基本原理是外源DNA克隆到载体上,载体转染到宿主细胞,可以利用载体上的抗性标记进行筛选。
服务内容
百欧泰可构建的细胞稳转株包括:
l 基因过表达稳转细胞株
l RNA干扰基因敲低稳转细胞系株
l CRISPR稳转细胞系基因敲除株
稳定细胞系构建流程
1. 载体构建:外源基因构建到载体。
2. 细胞筛选浓度测定:以10-14天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度。
3. 细胞接种:转染实验前一天接种细胞,各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞应达到60%-80%覆盖。
4. 细胞转染:用构建好的载体转染目的细胞。
5. 使用抗生素对细胞进行筛选。
6. 筛选结果鉴定。
稳定细胞株筛选方法
1. 转染质粒后,单克隆方法筛选稳定细胞系。
2. 病毒感染筛选稳定细胞株:该方法比质粒转染筛选单克隆方法更高效,是常用的稳定细胞系筛选方法。
服务优势
1.表达稳定:保证15代以内稳定转染细胞稳定表达。
2.操作迅速:一般在1个月以内完成构建。
3.价格合理:性价比高。
4.质量保证:外源基因严格质控。
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实验服务流程
双方沟通一致后确定实验方案,确定服务要求-签订合同—预付款-开始实验-成果交付
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